Het effect van de pH-waarde en de temperatuur van pyrrolidon op een waterige PVP-oplossing speelt een rol bij het behoud van celzaden. Een juiste werking en geschikte vriesomstandigheden kunnen de verandering of het verlies van celeigenschappen verminderen. Niet-verknoopte PVP-oplossing heeft geen speciale thixotropie, tenzij deze bij hoge concentratie thixotroop is en een zeer korte relaxatietijd vertoont. Ervaring met het invriezen van cellen: Het kiezen van het juiste invriesinstrument is de beste manier. Celbevriezing is een technologie die cellen opslaat in een omgeving met lage temperaturen, het celmetabolisme vermindert en langdurige opslag mogelijk maakt. (Pyrrolidon) In de meeste cellijnen is de verdikkingsprestatie van PVP nauw verwant aan de relatieve molecuulmassa ervan. Onder gegeven concentratieomstandigheden geldt: hoe groter de relatieve molecuulmassa, hoe groter de viscositeit ervan. Cellen zullen zich blijven ophopen en veranderen met veroudering en evolutie, waardoor ‘cultuurdrift’ van fenotype en genotype ontstaat. Correct en succesvol invriezen speelt een belangrijke rol bij de langdurige toepassing van cellen.
Tijdens het invriesproces moeten daarom de juiste kweek en voorzichtige celverzameling worden uitgevoerd. Vóór het invriezen moeten de cellen de beste groeitoestand behouden (in de logaritmische of exponentiële fase). Idealiter zou het kweekmedium 24 uur vóór de oogst moeten worden vervangen. Het wordt aanbevolen om de cultuur te controleren op microbiële verontreinigingen, vooral mycoplasma, om er zeker van te zijn dat de cellen niet besmet zijn. Tijdens het celverzamelingsproces moet de experimentele operatie zo zacht mogelijk zijn om celbeschadiging te voorkomen. (Pyrrolidon) Geschikt cryoprotectant. Momenteel is de algemeen gebruikte technologie voor het invriezen van cellen cryopreservatie met vloeibare stikstof, waarbij voornamelijk gebruik wordt gemaakt van een langzame invriesmethode met de juiste hoeveelheid beschermend middel om cellen te bevriezen en schade aan cellen tijdens het invriesproces te verminderen. Als cellen zonder beschermingsmiddel rechtstreeks worden ingevroren, zal het water binnen en buiten de cellen snel ijskristallen vormen, wat een reeks bijwerkingen veroorzaakt.
Polyvinylpyrrolidon, ethyleenglycol, methanol en methylaceetamide zijn allemaal cryoprotectanten. Dimethylsulfoxide (DMSO) en glycerol komen veel voor bij cryopreservatie van cellen. Deze twee stoffen hebben een klein molecuulgewicht, een hoge oplosbaarheid en kunnen gemakkelijk cellen binnendringen. Ze kunnen het vriespunt verlagen en de doorlaatbaarheid van celmembranen voor water vergroten. De sleutel ligt in de celaard. (Pyrrolidon) DMSO heeft gewoonlijk een concentratie van 5-10% (v/v), en de optimale concentratie varieert per cellijn. De uiteindelijke concentratie glycerol in het invriesmedium is 5-15%. Op dezelfde manier hangt de optimale concentratie af van de cellijn. Om de overlevingskans van moeilijk te conserveren cellen te vergroten, kunt u ervoor kiezen om tijdens cryopreservatie de serumconcentratie in de conserveringsoplossing te verhogen. Als u cellen sneller en gelijkmatiger wilt invriezen, is een celbevriezingsoplossing een goede keuze. Er is geen voorbereiding vereist. Voeg gewoon een geschikte hoeveelheid vriesoplossing toe aan de cellen. De bediening is eenvoudig en u kunt cellen krijgen met een hoge levensvatbaarheid.
